摘要： 在做MSI检测时，医生常常要求同时提供肿瘤组织和正常组织。这到底是多此一举还是必要步骤？这篇文章将为你彻底讲清楚MSI检测需要同时检测正常组织做对比吗这个关键问题，解释配对检测的原理、优势，以及在什么情况下可以省略。了解这些，能帮你更准确地解读报告，为治疗选择提供可靠依据。
在结直肠癌的精准诊疗中，微卫星不稳定性（MSI）检测已成为一项常规且至关重要的分子病理检查。数据显示，约15%的结直肠癌患者存在MSI-H状态，这部分患者对免疫检查点抑制剂治疗有显著疗效。然而，当患者或家属拿到检测申请单时，常会看到一个要求：同时提交肿瘤组织和“正常对照组织”。这个额外的步骤是否不可或缺？MSI检测需要同时检测正常组织做对比吗？答案是：在绝大多数情况下，是的，而且这直接关系到检测结果的准确性与可靠性。
一句话讲清楚：到底需不需要正常组织做对比？
需要。对于目前临床公认最准确的方法——基于PCR或二代测序（NGS）的片段分析或位点检测，同时分析患者的肿瘤组织和其自身的正常组织（通常是癌旁正常黏膜或血液白细胞）进行配对比较，是金标准做法。这并非流程上的冗余，而是由MSI的生物学本质决定的。MSI检测的不是一个绝对的“有”或“无”，而是肿瘤组织相对于患者自身正常基因背景所发生的“变化”。没有自身正常组织作为参照基准，就无法精准判断那些微卫星位点的长度变化是肿瘤特有的，还是患者天生就有的遗传多态性。
3个关键原因：为什么配对检测更靠谱？
第一，排除个体遗传背景干扰。每个人的微卫星位点长度本身就存在天然的细微差异，这属于正常的遗传多态性。单独看肿瘤组织的位点图谱，你无法区分一个异常信号是致癌性的突变所致，还是患者天生就如此。只有将肿瘤图谱与患者自身的正常组织图谱并排对比，那些在肿瘤中新增的、或者发生明显长度迁移的条带才能被确认为真正的“不稳定性”事件。
第二，提高检测的灵敏度和特异性。配对检测能有效降低假阴性和假阳性的风险。例如，某些肿瘤的MSI现象可能只发生在部分位点（即MSI-L），或者肿瘤细胞含量较低，信号微弱。通过与清晰的正常背景对比，这些细微的差异更容易被捕捉和确认。反之，也能避免将遗传多态性误判为MSI。
第三，适用于更广泛的样本类型。即使是福尔马林固定、石蜡包埋的陈旧组织，DNA可能存在降解。配对使用同一患者、同样处理条件的正常组织作为对照，可以抵消因样本质量带来的技术性波动，使结果判断更稳定。这直接回答了MSI检测需要同时检测正常组织做对比吗的核心关切——它是保证结果严谨性的技术基石。
不做对比行不行？这两种情况要分清！
虽然配对是金标准，但在特定技术路径和场景下，也存在“单样本”检测的方案。不过，这需要仔细辨别。
一种是基于免疫组织化学检测错配修复蛋白。这种方法通过检测MLH1、PMS2、MSH2、MSH4个蛋白在肿瘤细胞中的表达是否缺失来间接推断MSI状态。它通常只需要肿瘤组织，因为结果是看肿瘤细胞内有无着色，是一种相对独立的判读。但要注意，IHC与MSI检测的符合率并非100%，存在少数不一致的情况，且无法区分MSI-H和MSI-L。
另一种是某些经过特殊验证的NGS大Panel检测。这些Panel在生信分析时，会利用庞大的正常人基因组数据库作为“虚拟正常对照”，通过复杂的算法来推断肿瘤的MSI状态。这种方法虽然免去了额外取样，但其准确度高度依赖于算法模型和数据库的可靠性，在临界值附近或样本质量差时，不确定性会增加。对于临床关键决策，尤其是计划使用昂贵的免疫治疗前，许多专家仍推荐进行传统的、有配对正常组织的验证性检测。
你的检测报告怎么看？关键信息在这里
拿到MSI检测报告，不要只看结论“MSI-H”或“MSS”。几个细节决定了报告的权威性。首先，检查“检测方法”栏目。如果是“PCR毛细管电泳片段分析”或“NGS靶向测序”，报告中理应包含肿瘤和正常组织的对比电泳图或测序数据比对图。其次，关注“检测位点”。通常包含5个以上国际共识的位点。报告应明确列出每个位点在肿瘤和正常组织中的具体状态。最后，看“结论依据”。可靠的报告会明确写明“通过与患者自身正常组织对比，发现X个位点存在不稳定”。如果报告仅基于肿瘤单样本得出，了解其依据的算法或数据库就显得尤为重要。
选对方法很重要：PCR、NGS，哪种需要配对？
目前主流的MSI检测方法对配对组织的需求程度不同。传统的PCR+毛细管电泳法，这是过去多年的金标准，其原理就是直接比较肿瘤与正常组织在每个位点上的电泳峰图。这种方法必须、且绝对依赖配对正常组织，否则结果无法判读。
而NGS方法则存在光谱。一部分NGS检测是仿照PCR金标准流程设计的，同样需要配对样本进行湿实验和生信比对。另一部分则是前述的“虚拟对照”算法型。患者在选择时，可以直接询问检测机构：“这项MSI检测是否需要我提供血液或正常组织作为对照？” 这个问题的答案能帮你快速理解其所采用的技术路径和潜在的局限性。明确MSI检测需要同时检测正常组织做对比吗对于你所选择的具体技术而言，是沟通的关键。
给患者的实在话：检测前一定要问医生的几个问题
当医生建议进行MSI检测时，主动沟通可以避免后续困惑。可以询问：“医生，这次检测需要从我身上取正常组织做对比吗？是取血液还是癌旁组织？” 这关系到手术取样时是否需要预留特定样本。其次，“我们用的是哪种检测方法？是PCR、IHC还是NGS？” 再者，“如果无法提供正常组织，还有哪些替代方案？准确性会受多大影响？” 了解这些，能让你更清晰地参与诊疗决策，确保检测结果能最大程度地指导治疗，尤其是判断是否适合使用PD-1抑制剂等免疫药物。
最后总结：关于MSI检测对比，记住这3点就够了
归根结底，MSI检测需要同时检测正常组织做对比吗？核心在于对精准的追求。记住三点：第一，配对检测是当前最准确的金标准，能提供最可靠的答案。第二，IHC和部分高级NGS算法可作为补充或替代，但需了解其适用条件和局限性。第三，主动与病理科医生及临床医生沟通检测方法，确保样本送检符合要求。
随着液体活检和更强大生物信息学技术的发展，未来或许能从一管血中更便捷地完成MSI状态的精准判定。但现阶段，对于决定治疗方向的基石性检测，采用肿瘤与正常组织配对的检测策略，仍然是规避误判、确保患者最大化获益的审慎选择。在精准医疗的时代，每一个检测细节的严谨，都直接链接到治疗效果的差异。
