摘要： 做RAS检测，样本里肿瘤细胞的比例是个硬指标。这篇文章告诉你，为什么这个比例如此关键，不同方法要求到底是多少（比如20%还是30%），比例不够怎么办。搞懂这些，才能确保你的靶向用药检测结果真实可靠，不花冤枉钱。
开头先别急，我们聊聊为什么要有这个“比例”要求
李阿姨拿着肠癌病理报告，医生建议做个RAS基因检测，看看能不能用上靶向药。她满心期待，可病理科医生却看着她的活检组织切片直摇头：“这标本里肿瘤细胞有点少，可能达不到检测要求。”李阿姨懵了，做个检测，怎么还对细胞“数数”有要求？
这可不是医生故意为难。RAS检测对样本的肿瘤细胞比例要求是多少？ 这个问题的背后，关乎检测结果的生死——是“真阴性”还是“假阴性”。简单说，检测就像在一杯混了沙子的米里找几粒发霉的米。如果沙子（正常细胞或间质细胞）太多，发霉的米（突变肿瘤细胞）太少，机器很可能根本“看”不到那些坏米，最后告诉你“没发现突变”。结果呢？你可能就错过了一个有效的靶向药机会。
肿瘤细胞比例？其实就是“纯度”问题
我们常说的肿瘤细胞比例，行话叫“肿瘤细胞富集度”或“肿瘤纯度”。它指的就是在送去检测的那一小块组织里，真正携带突变、属于肿瘤的细胞，占所有细胞（包括肿瘤细胞、正常上皮细胞、炎症细胞、纤维细胞等）的百分比。
这不是一个可有可无的参数。目前的检测技术，无论是PCR、NGS（二代测序），还是FISH，灵敏度都有极限。它们是在一堆DNA信号里寻找特定的突变信号。如果突变信号太微弱，被大量正常细胞的DNA信号“淹没”了，仪器就分辨不出来。所以，保证足够的肿瘤细胞比例，本质是保证突变信号足够强，能被准确捕捉到。你想想，如果一份样本里一半以上都是正常细胞，那检测的到底是谁的基因？
比例不够会怎样？假阴性！结果可能“骗”了你
最直接的后果就是“假阴性”。检测报告上写着“RAS基因野生型（未突变）”，你以为不能用靶向药，但实际上，肿瘤组织里可能存在突变，只是没被检测出来。
这在临床上可不是小事。对于结直肠癌患者，RAS野生型是使用西妥昔单抗等EGFR单抗类靶向药的前提。一个假阴性报告，可能让本该受益的患者失去治疗机会，转而接受效果可能较差的化疗，或者承担不必要的药物副作用和经济负担。反过来，如果是假阳性（比例要求不足时较少见，但某些技术可能存在），又可能导致误用无效药物。
所以，RAS检测对样本的肿瘤细胞比例要求是多少，并不仅仅是一个技术参数，它直接挂钩于治疗决策的准确性与患者的生存获益。
20%？30%？不同检测方法，门槛不一样
那么，具体的比例要求到底是多少？答案不是固定的，它取决于你采用的检测技术。
目前主流的方法主要有两种：传统/数字PCR法和二代测序（NGS）。它们的“门槛”有差异。
PCR法（包括ARMS-PCR等）：这是比较经典的方法，灵敏度相对较高。大多数实验室和试剂盒会要求肿瘤细胞比例不低于20%。有些要求严格的平台或为了检测低频突变，甚至会把标准提高到30%。
二代测序（NGS）：NGS技术更强大，能同时测很多基因，灵敏度也更高。对于常规的NGS panel，很多实验室将最低肿瘤细胞比例要求设定在20%。但对于一些超高深度的NGS技术，或者专门用于检测极低丰度突变的液态活检（测血液里的ctDNA），这个要求可以放宽，甚至能检测出比例低于1%的突变。
记住，20%是一个常见的“生命线”，但具体一定要以你所送检实验室的官方要求为准。他们在接收样本前，病理医生会做评估。
你的样本合格吗？病理医生如何“数细胞”
你可能会好奇，这个比例是怎么算出来的？难道真是一个个数吗？差不多就是这个意思。
在切片制成后，病理科医生会在显微镜下对染色后的组织进行观察评估。他们凭借丰富的经验，在肿瘤细胞最密集的区域（热点区域）进行估算：视野里有多少个肿瘤细胞核，有多少个正常或间质的细胞核，心里快速算出一个百分比。这个过程专业上称为“镜检评估”。有时，为了更精确，也会采用计算机图像分析软件来辅助计数。
所以，在样本送检前，病理审核是第一道关。医生如果觉得比例不够，可能会在报告上注明“肿瘤细胞比例约10%，建议富集后检测”或直接建议重新取样。
比例不够怎么办？别慌，我们有这几招
万一评估结果不理想，是不是检测就做不成了？别轻易放弃，还有补救措施。
1. 样本宏切割：这是最常用的方法。病理医生在显微镜下，用笔在切片上圈出肿瘤细胞最集中的区域（可能只有几毫米），然后技术员对应地从石蜡组织块上只切取这一小部分。这就相当于把“沙子”去掉，只取“米”最集中的那一撮，从而大大提高肿瘤细胞的相对比例。
2. 组织刮取/穿刺：类似宏切割，用细针从组织块上特定区域获取细胞。
3. 请求蜡块：如果送检的是白片（已切好的玻璃切片），可以考虑向原医院申请借用对应的石蜡组织块，以便实验室自己进行富集操作。
4. 重新活检：当上述方法都无法实施或富集后比例仍不达标时，与临床医生沟通，评估是否有可能再次进行活检，获取质量更高的样本。虽然麻烦，但为了一个准确的结果，有时是必要的。
除了比例，还有哪些因素影响RAS检测结果？
肿瘤细胞比例是关键，但不是唯一。样本本身的质量是综合考量的结果。
组织大小与细胞量：样本太小，细胞总数太少，即使比例100%，提取的DNA量也可能达不到检测下限。
固定与处理：手术或活检后，组织必须及时用足量的10%中性福尔马林固定。固定不及时或不当，会导致DNA降解，影响检测成功率。
坏死与降解：肿瘤组织内部如果有大片坏死，或者样本存放过久降解，可用的肿瘤DNA也会大打折扣。
肿瘤异质性：肿瘤内部本身可能“百花齐放”，穿刺取到的部位万一恰好是突变阴性克隆，也会导致漏检。这解释了为什么有时需要多区域取样。
记住这几点，让你的检测结果更靠谱
说了这么多，作为患者或家属，我们能做什么来确保检测顺利和准确呢？
1. 信任并配合病理医生：他们提出比例不足的疑问时，是在为结果的准确性负责。积极沟通，了解是否有富集的可能。
2. 关注样本类型：优先选择手术切除的新鲜标本，其次是大活检标本。细针穿刺细胞学标本往往细胞量少，比例评估困难，不是最佳选择。
3. 选择有资质的实验室：正规的、通过认证的实验室（如CAP认证）有严格的样本接收和质量控制流程，能最大程度避免不合格样本进入检测环节。
4. 理解报告内涵：拿到检测报告，不要只看“阴性”“阳性”的结论。留意一下报告上是否注明了“肿瘤细胞比例”或“样本质量评估”。一份负责任的报告会包含这些信息。
5. 主动询问：如果你的RAS检测对样本的肿瘤细胞比例要求是多少心存疑问，直接向主治医生或检测实验室咨询。了解清楚要求，才能更好地配合整个流程。
精准医疗，诊断先行。而精准的诊断，始于一份合格的样本。别再以为把组织送去检测就万事大吉了，从源头上把控好样本质量，才是迈向正确治疗的第一步。当你或家人面临需要做RAS检测时，请务必重视这个关于“比例”的小问题，它可能决定着后续治疗的大方向。
