摘要： 很多患者和家属都担心，MET检测对样本的要求是不是特别高？尤其是穿刺拿到的小标本，是不是很容易就检测失败了？这篇文章就从临床病理和分子诊断的角度，把样本要求、小标本的优缺点、如何提高成功率以及失败后的应对策略，一次给你讲清楚，帮你为精准治疗做好充分准备。
在非小细胞肺癌的靶向治疗领域，MET基因异常（如14号外显子跳跃突变、扩增）已成为一个至关重要的治疗靶点。据统计，约3%-4%的非小细胞肺癌患者存在MET 14号外显子跳跃突变。然而，精准治疗的前提是精准诊断，而精准诊断的基石是合格的检测样本。一个核心且常见的问题是：MET检测对样本的要求高吗？穿刺小标本容易失败吗？ 这直接关系到患者能否及时获得有效的治疗机会。
MET检测对样本的要求高吗？关键就看这3个“硬指标”
是的，MET检测对样本确实有明确且相对严格的要求，这并非刻意提高门槛，而是由检测技术本身的原理决定的。无论是使用免疫组化（IHC）、荧光原位杂交（FISH）还是下一代测序（NGS），合格的样本是结果准确可靠的保障。具体要求可以归纳为三个核心“硬指标”：
第一，肿瘤细胞含量。这是最重要的指标。对于NGS检测，实验室通常要求样本中肿瘤细胞的比例不低于20%。如果肿瘤细胞比例过低，大量的正常细胞或间质细胞会“稀释”肿瘤DNA，可能导致突变信号无法被有效捕获，从而出现假阴性结果。病理医生在样本前处理时，会通过显微镜观察进行富集，但前提是标本中要有足够多的肿瘤细胞可供挑选。
第二，样本的细胞数量与DNA质量/数量。检测，尤其是NGS，需要足量且完整的DNA。样本中的细胞总数要足够，提取出的DNA总量和纯度需达到检测平台的下限要求。DNA如果发生严重降解（比如样本固定不当或存放过久），即使细胞数量多，也可能无法进行有效扩增和测序。
第三，样本的前处理质量。这主要指组织样本的固定情况。使用10%中性福尔马林及时、充分固定是标准操作。固定不及时或固定时间过长，都会引起DNA交联、降解，严重影响检测成功率。因此，MET检测对样本的要求高吗？ 答案是肯定的，它高度依赖于上述三个环节的质量控制。
穿刺小标本容易失败吗？真相可能和你想的不一样
一提到“穿刺小标本”，很多人脑海中会立刻浮现“组织少、容易失败”的印象。但实际情况更为复杂，不能一概而论。穿刺小标本（如CT引导下肺穿刺、支气管镜活检获取的组织）确实是挑战，但并非注定失败。
小标本的主要劣势显而易见：组织量有限，肿瘤细胞绝对数量可能较少，且可能混有更多血液或正常组织。这确实增加了不满足上述“硬指标”的风险。如果穿刺位置不准，取到的肿瘤细胞寥寥无几，失败率自然会升高。
但是，小标本也有其独特的优势！现代穿刺技术，特别是在影像引导下的精准穿刺，已经能相当准确地命中肿瘤富集区域。更重要的是，小标本的处理流程往往更优：它们通常能更快地被放入福尔马林中固定，避免了手术大标本因等待病理医生剖开、取材而可能发生的内部固定延迟问题。固定及时，DNA保存质量反而可能更好。
所以，穿刺小标本容易失败吗？ 关键在于“质”而非单纯“量”。一根穿刺条，如果富含高比例的肿瘤细胞且处理得当，其检测成功率完全可以很高。反之，一块很大的手术标本，如果坏死组织多或固定不良，也可能无法用于检测。失败风险与标本类型有关，但更与获取和处理过程的质量直接相关。
小标本做检测，这4件事做好了，成功率大大提升
既然小标本是临床常态，如何最大化其检测成功率？这需要临床、影像、病理和分子检测实验室的多学科协作。以下几个环节至关重要：
1. 精准穿刺，规划先行。 穿刺前，影像科医生与临床医生应充分沟通，通过增强CT等影像，选择肿瘤实性成分多、坏死少的区域作为靶点。避开大片坏死或出血区，是获取高质量样本的第一步。
2. “多穿一两条”的策略。 在患者安全允许的前提下，多获取1-2条组织芯，可以为病理诊断和分子检测提供更多的材料。其中一条可用于制作HE染色切片评估，另一条则专门留存于福尔马林或特定保存液中，专供分子检测使用，避免反复切取浪费。
3. 病理医生的即时评估。 这是提升成功率的核心环节！穿刺标本送到病理科后，应尽快进行快速现场评估（ROSE）或制作快速石蜡切片。病理医生在显微镜下立即评估样本的肿瘤细胞含量是否达标。如果不够，可以立即通知临床医生进行再次穿刺，避免患者二次往返和等待。
4. 规范的固定与转运。 标本离体后应立即浸入足量的10%中性福尔马林缓冲液中。固定时间需充分（通常6-48小时），但也不宜过长。之后，应按照实验室要求，在适宜温度下及时转运。避免样本干燥、冻融或置于高温环境。
做好这四点，能显著降低因样本问题导致的检测失败率，让珍贵的穿刺小标本物尽其用。
万一标本不合格或检测失败，我们还有哪些“后招”？
尽管我们力求一次成功，但临床上确实会碰到样本肿瘤细胞含量不足、DNA降解或初次检测失败的情况。此时，不必过于焦虑，仍有替代或补充方案可供选择。
最直接的方案是 “再次活检” 。如果患者身体状况允许，且病灶仍有可穿刺的靶区，再次活检获取新样本是最理想的。可以总结上次经验，优化穿刺方案。
当组织标本无法获取或再次活检风险高时， “液体活检” 成为了一个强有力的工具。通过抽取外周血，检测血液中循环肿瘤DNA（ctDNA）。对于MET 14号外显子跳跃突变等基因变异，液体活检具有相当的敏感性和特异性。它无创、可重复，尤其适用于监测耐药突变。但需注意，在肿瘤负荷低或肿瘤不向血液中释放DNA的情况下，可能出现假阴性。
此外，可以 “挖掘历史档案” 。回顾患者既往的手术或活检标本，调取留存的组织蜡块（FFPE块）进行检测。这些“老标本”只要保存得当，固定规范，仍然是可靠的检测材料。
最后，与分子检测实验室积极沟通。有些实验室提供超敏检测技术或针对低质量/低数量DNA的优化建库方案，或许能对边缘合格的样本进行“抢救性”检测。因此，面对穿刺小标本容易失败吗的担忧，即使遇到挫折，也有一系列成熟的临床路径可以应对。
给你的核心建议：如何为一次成功的MET检测做好准备？
为了确保MET检测能够顺利、有效地进行，患者和医疗团队可以共同从以下几个层面做好准备：
从临床决策层面，医生在决定进行活检前，就应将后续的分子检测需求纳入通盘考虑。与影像科、病理科提前沟通，制定“为分子检测而穿刺”的计划，而不仅仅是为了获得一个病理分类。
从患者沟通层面，患者和家属应理解活检对于后续精准治疗的关键意义，积极配合可能需要的多针穿刺或再次活检。了解检测流程，有助于缓解对未知的焦虑。
从样本处理层面，严格遵守标本固定、转运的标准化操作流程（SOP）是生命线。任何环节的疏漏都可能导致前功尽弃。确保标本从离体到进入检测实验室的整个链条都处于受控状态。
从技术选择层面，根据样本的具体情况（大小、细胞含量、预估DNA质量）和临床信息（是否疑似耐药），与分子病理专家共同选择最合适的检测技术（如针对小标本的靶向NGS panel、FISH或IHC）。对于组织量极少的情况，可优先考虑针对关键基因（如MET）的检测，而非大Panel。
归根结底，MET检测对样本的要求高吗？ 它要求的是规范、精准和全程质控。通过多学科团队的精心规划和患者的充分理解与配合，即使是穿刺获取的小标本，也能成为打开精准治疗之门的可靠钥匙。
