摘要： 很多患者和家属都关心，NTRK检测对样本的要求到底高不高？用穿刺取到的小块组织，会不会因为样本太少而查不出来，导致漏检？这篇文章通过一个真实的肺癌病例，详细解释了样本质量与检测结果的关系，告诉你哪些样本能用，如何提高小标本的检测成功率，避免错过宝贵的靶向治疗机会。
在肿瘤精准治疗时代，NTRK基因融合检测为部分罕见但可靶向治疗的癌症患者打开了希望之门。然而，一个现实问题摆在面前：NTRK检测对样本的要求高吗？穿刺小标本容易漏检吗？ 这是临床医生和患者共同面临的困惑。数据显示，样本质量不佳是导致基因检测失败或结果不准确的首要原因之一，比例可能高达15%-20%。我们先从一个病例说起。
故事开头：他的基因检测报告，为什么是“阴性”？
老张确诊肺腺癌时，肿瘤已经不小了。医生通过CT引导，用一根细针穿刺肿瘤，取出了几条米粒大小的组织。病理报告明确了是腺癌，但常规的EGFR、ALK检测都是阴性。听说还有更广谱的NTRK靶向药，老张和家人满怀希望地送检了那份穿刺标本。一周后，结果却让人失望：“未检出NTRK基因融合”。难道老张真的没有靶点吗？这个“阴性”结果，会不会和那份小小的穿刺样本有关？NTRK检测对样本的要求高吗？ 这个疑问开始盘旋在医生心头。
样本的“质量”和“数量”，哪个更重要？
很多人以为，样本越多越好。这话没错，但“质量”往往比单纯的“数量”更关键。什么是好质量？简单说，就是肿瘤细胞要“多”且“纯”。
穿刺标本虽然体积小，但如果针尖恰好穿到了肿瘤细胞最密集的区域，取出的组织里肿瘤细胞比例很高，那么它就是一份高质量的样本。反之，如果穿刺时混入了大量坏死组织、血液或正常的间质细胞，肿瘤细胞被“稀释”了，即便组织条看起来不小，有效成分也不够。
对于NTRK融合检测，尤其是依赖DNA或RNA的二代测序技术，需要足够数量和完整性的核酸。肿瘤细胞比例过低，就像在一袋大米里找几粒黑芝麻，机器很难捕捉到那微弱的融合信号，从而导致假阴性。所以，问题不在于穿刺标本本身，而在于穿刺到的内容是否“货真价实”。
穿刺标本真的“不靠谱”吗？关键看这2点！
那么，穿刺小标本容易漏检吗？ 不能一概而论。它的成功率，主要取决于两个环节。
第一是穿刺操作。有经验的介入科或病理科医生，会在影像引导下精准定位，避开坏死区，进行多次、多方向的取材，尽可能获取富含肿瘤细胞的条索。病理医生在收到标本后，会快速评估，如果觉得不够，有时会当场建议医生再穿一次。
第二是病理评估。标本制成蜡块后，病理医生必须做一个步骤：肿瘤细胞富集度评估。他们会在显微镜下看切片，估算肿瘤细胞占所有细胞的比例。这个比例，专业上叫肿瘤细胞含量（Tumor Cellularity）。对于大多数NTRK检测，这个含量最好能达到20%甚至30%以上。如果低于这个阈值，实验室可能会建议重新取样，或者采用更灵敏的技术。
所以，一份成功的穿刺小标本检测，是临床和病理团队紧密协作的结果。
除了穿刺，这些样本也能用？盘点5种常见检测样本
当穿刺标本不理想时，我们还有其他选择。样本来源其实挺多的：
1. 手术切除标本：这是“金标准”。肿瘤完整切除，组织量大，病理医生可以挑选肿瘤细胞最丰富的区域进行检测，结果最可靠。
2. 活检标本：包括支气管镜活检、胃镜活检等。和穿刺类似，属于小标本，同样需要评估质量和含量。
3. 细胞学标本：比如胸水、腹水、心包积液离心后制成的细胞蜡块，或者支气管刷检、细针穿刺涂片。这些样本中的细胞有时也能用于检测，但对制备技术和核酸质量要求更高。
4. 液体活检：抽血检测循环肿瘤DNA（ctDNA）。这是无创的方式，特别适合无法获取或再次获取组织标本的患者。但它也有局限性，对于NTRK融合这类发生率较低的改变，血液中的信号可能很微弱，灵敏度不如组织检测。
5. 既往病理蜡块：几年前甚至更早的手术或活检蜡块，如果保存完好，是可以重新切白片用于检测的。这为一些复发或进展的老患者提供了机会。
选择哪种样本，需要医生根据患者的具体情况、标本的可及性和检测技术的特性来综合决定。
如何避免漏检？给病理科医生的3条实用建议
作为连接临床与检测实验室的关键一环，病理科医生在确保NTRK检测准确性上作用巨大。这里有几点实用的经验：
多和临床医生沟通。在穿刺前，了解患者的疑似诊断和检测计划。如果高度怀疑是NTRK融合相关的肿瘤类型（如婴儿型纤维肉瘤、分泌性乳腺癌等），可以在申请单上特别标注，提醒操作医生尽可能多取一些组织。
严格做好标本的快速评估和预处理。标本离体后，要及时、规范地固定（通常用10%中性福尔马林），固定时间既不能太短也不能过长，否则都会破坏核酸。制成蜡块后，务必先切一张切片染色评估，确认肿瘤细胞含量达标再送检。
学会“省着用”小标本。对于极其珍贵的穿刺小标本，可以考虑与检测实验室沟通，采用一次提取核酸、同时进行多基因检测（如包含NTRK的融合基因panel）的方案，或者先进行RNA-based的筛查（因为NTRK融合是RNA水平的事件），最大化利用样本价值。
如果样本不够，我们还有别的办法吗？
面对一份肿瘤细胞含量不足的样本，直接检测风险很大。这时候，实验室有一些技术手段来“补救”。
一种方法是“肿瘤细胞富集”。比如通过显微切割技术，在显微镜下用激光把切片上成团的肿瘤细胞区域单独切割下来，只提取这部分细胞的核酸，从而“提纯”样本。这就像把混在沙子里的金粒一颗颗挑出来，虽然费时费力，但能显著提高检测成功率。
另一种方法是采用超高灵敏度的检测技术。一些数字PCR或基于独特分子标识符（UMI）的二代测序方法，能够从大量背景噪音中识别出极微量的目标序列，对低含量样本更友好。当然，这些技术成本也相对更高。
最根本的办法，还是与患者和家属充分沟通，评估再次活检的风险与获益。有时，为了一个明确的、可能改变治疗方向的答案，值得冒一次可控的风险去获取新的组织。
回到案例：更换样本后，结果竟然大不同！
老张的故事还有后续。鉴于临床特征仍有疑点，医生和他商量后，决定对两年前他因肺部小结节做的一个楔形切除手术的蜡块进行重新检测。那份标本当时病理是良性，但现在回顾性分析，有一个区域细胞活跃。
结果出乎所有人意料：在那份旧标本中，检测出了罕见的ETV6-NTRK3基因融合！原来，老张的肿瘤可能很早就存在这个突变，此次进展是原有疾病的复发或转移。正是这个发现，让他顺利用上了拉罗替尼，病情得到了快速控制。
这个病例戏剧性地说明，最初的穿刺标本阴性，很可能是因为取样偏差或肿瘤异质性（即肿瘤内部不同区域基因突变可能不同），而并非真正的“无靶点”。这也再次印证了，NTRK检测对样本的要求高吗？ 答案是肯定的，高质量的样本是准确诊断的基石。
总结与建议：想做NTRK检测，你最好提前知道这几件事
聊了这么多，我们来总结几个关键点，如果你或家人正在考虑NTRK检测，这些信息或许有帮助：
别小看任何一份样本。无论是穿刺还是活检，取得后都应立刻规范固定，这是保证后续所有检测步骤成功的起点。
主动询问病理评估结果。可以请医生关注一下送检标本的“肿瘤细胞含量”评估，如果含量偏低，要意识到假阴性的风险，并与医生讨论其他备选方案（如用旧蜡块、尝试液体活检等）。
理解“阴性”结果的复杂性。一份组织检测报告为阴性，不等于体内绝对没有NTRK融合。可能是样本没取到，可能是技术局限，也可能是真的没有。对于临床高度怀疑但组织检测阴性的情况，多学科讨论和考虑其他检测手段（如液体活检）非常重要。
选择有经验的检测平台。正规的、有良好质控体系的实验室，会严格评估样本质量，对不合格样本提出建议，并拥有多种技术平台（如DNA测序、RNA测序、FISH等）进行交叉验证，最大程度减少穿刺小标本容易漏检吗这样的遗憾。
肿瘤的精准诊疗，就像一场需要临床、病理、检验和患者四方紧密配合的接力赛。每一份样本都承载着生命的希望，善待它，审慎地分析它，才能不让任何一个有价值的治疗机会从指缝中溜走。
